大鼠適應(yīng)環(huán)境2周后，開始卵巢摘除術(shù)

1.大鼠常規(guī)麻醉，固定。

2.卵巢摘除術(shù)：7周雌性Wistar大鼠（200-220g）于最末肋骨下，腋中線和距脊柱外側(cè)2cm交叉處剪除長毛，常規(guī)消毒后，切開皮膚和背肌，用眼科鑷夾卵巢，分離脂肪團(tuán)，結(jié)扎血管，切除卵巢，縫合肌層和皮膚。

3.術(shù)后回復(fù)2周。

4.慢性不可預(yù)知性溫和刺激(CUMS)：在11種壓力源中，每天使用兩種，持續(xù)6周。按隨機(jī)順序：連續(xù)通宵照明（12小時(shí)），間歇性照明（燈亮1小時(shí)和熄滅1小時(shí)；3小時(shí)），成對籠（每個(gè)籠中2-3只動(dòng)物；3小時(shí)），空籠飼養(yǎng)（18小時(shí)），物理約束（2小時(shí)） 籠傾斜45度（3小時(shí)），缺水（24小時(shí)），食物剝奪（24小時(shí)）、夾尾（1分鐘）、夜間白噪音（80-85dB；3小時(shí)）或濕墊層（400毫升水加入200克鋸末墊層；18小時(shí)）。

 1.蔗糖偏好測試：這項(xiàng)測試在CUMS開始之前和每周結(jié)束時(shí)。大鼠單籠飼養(yǎng)，給兩瓶溶液（填充1.0%蔗糖溶液）24小時(shí)。下一個(gè)24小時(shí)，將一瓶蔗糖溶液替換為水。然后，將大鼠剝奪食物和水24h，接著給予兩個(gè)預(yù)先稱重的瓶裝溶液（1.0%蔗糖溶液和普通水）1小時(shí)。每次試驗(yàn)都更換瓶子的位置。測試結(jié)束后，記錄蔗糖溶液和水的消耗量。蔗糖偏好=蔗糖溶液消耗量/蔗糖溶液消耗量的量+水的消耗量。

    2.強(qiáng)迫游泳試驗(yàn)：一個(gè)垂直的玻璃圓筒（40厘米高，30厘米直徑），注入25±1°C的水，深度為30 cm。測試時(shí)，將每只大鼠置于圓筒中5分鐘，記錄靜止、游泳和攀爬的持續(xù)時(shí)間。檢測抑郁相關(guān)行為。

3.高架+迷宮試驗(yàn)：檢測焦慮相關(guān)行為。